现在 ,卡介苗及其衍生物不但在防治肿瘤、控制感染、用于免疫佐剂等方面显示出极大的应用价值 ,由于没有糖皮质激素引起的免疫抑制副作用 ,在支气管哮喘 (简称哮喘 )等变态反应性疾病防治中的地位也备受关注。
卡介苗
卡介苗作为结核杆菌的减毒活疫苗 ,具有很强的非特异性免疫刺激作用 ,能够诱导机体产生Ｔｈｌ细胞免疫反应 (简称Ｔｈｌ反应 )。国外有研究提示 ,儿童时期感染结核杆菌 ,可以诱导体内发生Ｔｈｌ反应 ,从而降低哮喘的发病率。同时 ,这也向人们昭示 ,作为一种Ｔｈｌ反应的强力诱导剂 ,卡介苗可能为哮喘的防治提供一条新途径。近年来 ,国外研究者发现 ,在小鼠卵蛋白致敏前 14天给予卡介苗腹腔注射 ,能够促进其体内ＴｈＯ细胞向Ｔｈｌ细胞分化 ,并活化Ｔｈｌ细胞、巨噬细胞、单核细胞 ,增加干扰素γ、白介素 12等的分泌 ,阻断免球蛋白Ｅ的合成 ,使支气管肺泡灌洗液中Ｔｈ2细胞因子的水平降低 ,激发以Ｔｈｌ型为主的细胞反应 ,从而明显减轻卵蛋白引起的肺部嗜酸性粒细胞增多 ,且阻止了气道高反应的发生 ,对哮喘有预防作用。国外还有学者通过研究发现 ,机体即使在卵蛋白致敏后 ,于激发前、激发时甚至激发后 ,Ｔｈ2反应已经建立的情况下 ,再给卡介苗腹腔注射 ,仍同样可以缓解卵蛋白致敏而激发引起的气道痉挛、嗜酸性粒细胞增多等机体反应。国外 ,有研究者曾对哮喘患者使用卡介苗鼻腔内给药治疗 ,获得了很好的防治效果 ,这表明卡介苗局部给药也同样具有免疫调节作用。但使用卡介苗后容易出现发热、过敏性休克、淋巴结炎等不良反应 ,严重者会诱发全身结核感染 ,有较多的毒副作用 ,限制了其进一步广泛应用于临床。因此 ,近年来 ,有学者对从卡介苗中提取有效成分产生了极大兴趣 ,如卡介苗的细胞壁骨架、纤维蛋白结合素、卡介苗ＤＮＡ、磷酸胞苷酰基鸟苷等。卡介苗的上述成分 ,均可起到调节Ｔｈｌ/Ｔｈ2反应平衡的作用 ,能够阻断哮喘发病的多个环节 ,故有广阔的应用前景。
卡介苗ＤＮＡ
国外有研究者 ,将从卡介苗中分离出的卡介苗ＤＮＡ与哮喘患者的外周血单核细胞共同孵育 ,发现卡介苗ＤＮＡ可使哮喘患者外周血的单
核细胞产生干扰素γ、白介素 12的量增加 ,从而抑制免疫球蛋白Ｅ的产生 ,而对免疫球蛋白Ａ的产生没有影响 ,从而显示了卡介苗ＤＮＡ在过敏性哮喘治疗中具有潜在的应用价值。
磷酸胞苷酰基鸟苷
为明确卡介苗ＤＮＡ发挥免疫活性作用所需的碱基序列 ,国外研究者依据已知的基因编码 ,用卡介苗的各种克隆ＤＮＡ合成了许多寡核苷酸 ,并分别测定了其增强小鼠天然杀伤细胞活性的效力 ,发现含有非甲基化的磷酸胞苷酰基鸟苷是诱导干扰素生成和激活天然杀伤细胞所必需。此后 ,人们将此类特定结构的寡核苷酸称为磷酸胞苷酰基鸟苷基因序列 ,又称免疫激活序列 ,并认为磷酸胞苷酰基鸟苷的侧翼碱基及核酸骨架对机体免疫活性有较大影响。有研究表明 ,磷酸胞苷酰基鸟苷不仅能防止Ｔｈ2型免疫应答的启动 ,而且能使正在发展的Ｔｈ2型免疫应答转向Ｔｈｌ型。这种免疫应答转向作用提示 ,磷酸胞苷酰基鸟苷可能在哮喘的预防及治疗中 ,均有应用潜力。人们通过对多种哮喘动物模型的研究发现 ,无论腹腔注射给药还是鼻腔滴入给药 ,无论是致敏后还是激发前、后给药 ,磷酸胞苷酰基鸟苷都能完全抑制变应原引起的哮喘动物呼吸道嗜酸性粒细胞增多 ,降低支气管的高反应性 ,抑制肺部及全身的Ｔｈ2型免疫应答 ,降低变应原诱生的白介素 4水平及减少免疫球蛋白Ｅ合成 ,尤其在磷酸胞苷酰基鸟苷与抗原同时使用的情况下 ,效果特别明显。更有意义的是 ,磷酸胞苷酰基鸟苷提供的保护作用能持续相当长的时间 ,有研究发现 ,单剂磷酸胞苷酰基鸟苷与致敏原同时注射后 ,不仅有迅速的抗哮喘作用 ,而且对长至 6周后的变应原重复刺激也具有保护作用 ,如将磷酸胞苷酰基鸟苷与抗原共价结合后气道内给药 ,效果较不结合者强 100倍 ;其抑制嗜酸性粒细胞聚集的作用可以持续 2个月。目前 ,有学者认为 ,磷酸胞苷酰基鸟苷发挥作用的机制与以下因素有关 :磷酸胞苷酰基鸟苷能直接激活Ｂ细胞、巨噬细胞、树突状细胞等抗原提呈细胞而无需其它辅助细胞的参与 ,进而增强了Ｔ淋巴细胞反应 ;磷酸胞苷酰基鸟苷经吸附内吞作用进入天然杀伤细胞、巨噬细胞等细胞胞体内 ,启动了相关细胞因子的基因转录 ,能诱导这些细胞因子高水平转录。而这些细胞因子能促使ＴｈＯ细胞向Ｔｈｌ细胞分化 ,并进一步促进天然杀伤细胞、巨噬细胞活化 ,促进Ｂ细胞的有丝分裂 ,从而形成一个正反馈循环 ,增强了细胞免疫和以免疫球蛋白Ｇ抗体为特征的免疫反应 ,诱导了Ｔｈｌ反应的发生 ,使Ｔｈ2反应受到抑制 ,纠正了哮喘中存在的Ｔｈｌ/Ｔｈ2反应失调情况 ,并进一步抑制了由于Ｔｈ2型细胞因子功能亢进引起的免疫球蛋白Ｅ产生、嗜酸性粒细胞增殖和活化、气道痉挛等反应。但磷酸胞苷酰基鸟苷激活序列有严格的种属特异性。例如 ,人和小鼠的磷酸胞苷酰基鸟苷基因序列就不完全一样 ,而且人的免疫细胞对磷酸胞苷酰基鸟苷基因序列的侧翼碱基、拷贝数及位置有更严格的要求 ;反之 ,对小鼠天然杀伤细胞、Ｂ细胞具有极强免疫活性的磷酸胞苷酰基鸟苷最佳序列 ,对人的天然杀伤细胞却几乎无影响。
其它成分
国内有使用卡介苗素注射液治疗哮喘的报道 ,卡介苗素为卡介苗除去蛋白质后提取的有效成分 ,也是一种非特异性免疫调节剂。哮喘患者肌肉注射卡介苗素后使血清免疫球蛋白Ｇ升高 ,刺激单核巨噬细胞系统 ,使干扰素γ、白介素 12增多 ,并能稳定气道壁上的肥大细胞膜 ,抑制其脱颗粒 ,从而降低了气道的高反应性。
在现代社会 ,尤其是西方发达国家 ,哮喘的发病率呈明显增高趋势。流行病学调查发现 ,这与卫生条件改善后 ,幼儿感染机会大减 ,尤其是与增强Ｔｈｌ免疫应答的细胞内病原体感染几率大为减少有关。目前 ,幼儿普遍接受的疫苗中 ,绝大多数是诱发Ｔｈ2型免疫应答 ,这亦可能对机体Ｔｈｌ/Ｔｈ2平衡的紊乱起到推波助澜的作用 ,从这个意义上说 ,卡介苗及其衍生物的治疗更具合理性。
