运送插入基因的载体可分为病毒载体和非病毒载体 ,常用的病毒载体有逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒等 ,非病毒载体则有脂质体、脂质体 /ＤＮＡ复合体、裸ＤＮＡ等。ｏｎｙｘ - 015曾是一个引人注目的、靶向治疗肿瘤的重组腺病毒 ,但后来发现ｏｎｙｘ- 015也能在ｗｔｐ53细胞中复制 ,复制效率要低很多 ,复制速度也慢。由于ｏｎｙｘ -01 5毕竟还能杀死瘤细胞 ,故临床试验仍在进行中。

　　腺病毒的病毒ＤＮＡ可在细胞内复制 ,继而导致细胞裂解死亡 ,故将其称溶瘤病毒 ,他们一般不感染正常细胞。溶瘤病毒的治疗指数很高 ,可达 100000:1,一般化疗的治疗指数为 6:1,因此 ,近年来备受关注 ,例如 ,动物试验证实 ,疱疹性口腔炎病毒、呼肠孤病毒对卵巢癌和结肠癌有效。目前进入临床试验的溶瘤病毒有ｏｎｙｘ - 015、ＣＶ 706、Ｇ207、Ｖ -ＧＭ -ＣＳＦ、Ｒｅｏ及ＶＳＶ。

　　肿瘤相关基因

　　与肿瘤发病相关的基因主要有两类 ,即癌基因和抑癌基因 ,近年来还发现一种新的肿瘤发病相关基因──增变基因。最近 ,在转基因动物实验中 ,人们发现一种癌基因依赖现象 ,即肿瘤的发生涉及多个癌基因 ,但在这些癌基因中 ,某些癌基因的作用依赖于某个癌基因 ,该癌基因即为主基因 ,敲除主基因就可促进肿瘤细胞分化或凋亡 ,该发现为肿瘤的靶向肿瘤基因治疗带来了希望。

　　有的抑癌基因是细胞周期的重要调控者 (如ＲＢ基因 ) ,有的则维持基因组的整体完整性 (如ＢｒＣａ1)。研究表明 ,将单个抑癌基因的野生型转入肿瘤细胞后 ,对肿瘤细胞恶性表型有明显的影响。因此 ,针对抑癌基因的靶向治疗是研究的热点。最近 ,借助一些高通量检测技术 ,人们发现肿瘤基因组的变异很多 ,包括癌基因的功能获得性变异和抑癌基因的功能丢失性变异 ,它们与肿瘤发生发展的关系尚不十分清楚。

　　靶向病因治疗

　　肿瘤的病因主要是化学致癌物 ,但也有一部分与病毒有关 ,如肝癌、宫颈癌、鼻咽癌的病因都涉及ＤＮＡ肿瘤病毒。

　　ＲＮＡ干扰 (ＲＮＡｉ)是基因组的免疫系统 ,具有很强的抗病毒作用。ＲＮＡｉ的生物学作用主要在调节基因功能 ,同时也是基因组的“免疫系统” ,具有抗病毒感染、抑制转位子活性、对异常ＲＮＡ产生反应等作用 ,可作为检测基因功能的工具 ,还可作为肿瘤靶向基因治疗工具。宫颈癌与人乳头状瘤病毒感染有关 ,乳头状瘤病毒的Ｅ6和Ｅ7蛋白分别与ｐ53和ＲＢ蛋白结合 ,应用ＲＮＡｉ技术 ,使Ｅ6和Ｅ7表达沉默 ,就可导致体外培养的宫颈癌细胞停止增殖 ,并发生凋亡。

　　肿瘤分子分类与靶向基因治疗

　　肿瘤的分类对临床治疗至关重要 ,目前主要依据病理形态学分类 ,但病理组织学表现相同的肿瘤 ,临床病程及对治疗反应可明显不同。

　　肿瘤的分类有两种情况 ,一是发现新的亚类 ,二是将其归入早已明确的类别。根据基因表达谱 ,可将有些肿瘤进一步细分。Ｇｏｌｕｂ开创了肿瘤分子分类的先例 ,根据基因表达谱可明确区分急性粒细胞性白血病 (ＡＭＬ )和急性淋巴细胞性白血病(ＡＬＬ) ,这属于第二种分类情况。根据弥漫性大Ｂ细胞淋巴瘤基因表达谱 ,可将其进一步分为生发中心Ｂ样和活化Ｂｘｉｂａｏ样两个亚型 ,这属于第一种分类情况 ,两种亚型的弥漫性大Ｂ细胞淋巴瘤经治疗后的 5年生存率差异较大。因此 ,肿瘤的分子分类引起了广泛的关注 ,目前 ,已有将前列腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、结肠癌及鼻咽癌等肿瘤进行分子分类的报告。

　　肿瘤干细胞与靶向基因治疗

　　“肿瘤干细胞”指肿瘤中少数具有无限增殖潜能、驱动肿瘤的形成与生长的细胞。正常干细胞是细胞转化、突变的靶细胞 ,而肿瘤干细胞则驱动肿瘤细胞增殖。自我更新是干细胞最重要的特征 ,正常和肿瘤干细胞都具有该种能力 ,不同的是正常干细胞自我更新即细胞增殖和分化是受控制的 ,处于有序状态 ,而肿瘤干细胞的自我更新处于失控、无序状态。

　　目前有关肿瘤干细胞存在的证据主要也是根据他们的自我更新能力所进行的研究成果 ,例如小鼠骨髓瘤中只有 0.01%～ 1%的细胞有集落形成能力 ,同样 ,肺癌、卵巢癌或神经母细胞瘤中有集落形成能力的细胞也只占 0.02%～ 0.1% ,白血病细胞有1%～ 4%。因此 ,人们认为只有少数肿瘤细胞有持久的致瘤能力和形成肿瘤能力 ,它们就是肿瘤干细胞。肿瘤干细胞对于治疗肿瘤有重大意义 ,如治疗能特异性杀死肿瘤干细胞 ,即使肿瘤体积不缩小 ,肿瘤也会逐渐消退。

　　因此 ,肿瘤干细胞应是靶向基因治疗或靶向治疗的目标。目前尚无法区分肿瘤干细胞与一般肿瘤细胞或正常干细胞 ,这已成为一个研究热点 ,有研究结果显示 ,人ＡＭＬ干细胞是ＣＤ34+ＣＤ38-细胞 ,约占ＡＭＬ细胞的 0.2%。最近 ,人们还发现人乳腺癌干细胞是ＣＤ44+ＣＤ24-细胞 ,并分离到该细胞。