乌贼属于软体动物门 ,头足纲的一种海洋动物。乌贼墨对功能性子宫出血、肺结核咯血等出血性疾病有止血作用。 20世纪 9 0年代日本学者发现乌贼墨中含有一种肽聚糖对Ｍｅｔｈ-Ａ肿瘤的抑制率达 64%。目前关于乌贼墨的抗肿瘤机制 ,以中国医科大学吕昌龙、谢光麟、王群等人研究较多 ,主要集中在免疫方面 ,并不断有新的进展。

　　诱导ＮＫ、ＬＡＫ杀伤活性

　　自然杀伤 (ＮＫ)细胞是机体非特异性细胞免疫的重要组成部分 ,活化的ＮＫ细胞可合成和分泌多种细胞因子 ,发挥调节免疫的作用。其杀伤活性无主要组织相容性复合体限制 ,不依赖抗体 ,通过与瘤细胞的密切接触 ,直接杀伤同系、同种及异种瘤细胞 ,也可通过抗体依赖细胞介导的细胞毒作用 (ＡＤＣＣ效应 )杀伤被特异性ＩｇＧ包被的瘤细胞。用乌贼墨连续 5天给ＢＡＬＢ/ｃ小鼠和Ｓ180及ＭｅｔｈＡ荷瘤鼠灌胃后 ,乌贼墨使小鼠ＮＫ细胞杀伤活性增强 ,实验组与对照组比较有显著性差异 ;诱生后 24小时至7天ＮＫ细胞杀伤活性处于高峰 ,两周左右恢复正常水平 ;并可使荷瘤小鼠ＮＫ细胞活性增强 ,抑制荷瘤鼠瘤体的生长。

　　ＬＡＫ细胞即淋巴因子激活的杀伤细胞 ,能杀伤对ＮＫ、细胞毒性Ｔ淋巴细胞 (ＣＴＬ细胞 )不敏感的肿瘤细胞 ,具有广泛的杀瘤谱。经乌贼墨连续灌胃 5天后 ,小鼠的ＬＡＫ细胞对靶细胞 (ＹＡＣ - 1细胞 )的体外杀伤活性较对照组明显加强。

　　激活巨噬细胞

　　巨噬细胞能直接吞噬和杀伤病原体 ,参与特异性免疫应答 ,发挥抗原加工、提呈和免疫调节作用 ;可在某些细胞因子的刺激下 ,活化成为效应细胞 ,不仅具有杀伤肿瘤细胞的活性 ,而且能释放一些细胞因子来发挥抗肿瘤作用。口服乌贼墨实验组小鼠巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率为 (55. 8± 9 . 5)%,对照组为 (32. 1± 5. 1)%,吞噬指数分别为 3. 12± 0. 41和 2. 38± 0. 50,两组之间差异显著 ;并且实验组小鼠的胸腺、脾脏明显重于对照组。表明乌贼墨及提取物在体内对巨噬细胞均有较强的刺激作用 ,使巨噬细胞成为有效的效应细胞 ,参与抗肿瘤免疫。

　　诱生多种细胞因子

　　对酌 -干扰素 (ＩＦＮ -酌 )的诱导ＩＦＮ -酌主要由活化的Ｔ细胞和ＮＫ细胞产生 ,是ＮＫ细胞活性激活剂 ,可增强ＮＫ细胞杀伤活性 ,充分激活单核 -巨噬细胞。采用酶联免疫法检测经乌贼墨灌胃后小鼠血清中ＩＦＮ -酌的水平 ,结果显示 ,小鼠ＩＦＮ -酌的水平于灌胃 24小时开始升高 , 48小时达高峰 , 72小时降至正常水平。

　　对肿瘤坏死因子 -α(ＴＮＦ -α)诱生作用ＴＮＦ -α具有广泛的生物学活性 ,参与炎性反应和免疫应答 ,抗肿瘤 ,参与内毒素性休克等病理过程。将小鼠分为乌贼墨灌胃和乌贼墨提取物腹腔注射两个实验组 ,并设相应对照组。结果显示 ,实验组ＴＮＦ -α的水平比对照组均显著升高。ＴＮＦ -α的来源主要为巨噬细胞 ,提示乌贼墨及其提取物对巨噬细胞具有活化作用。

　　此外 ,乌贼墨对多重集落刺激因子、白介素- 1和白介素 - 2均有诱生作用。

　　影响蛋白激酶活性

　　蛋白激酶是一种磷酸转移酶 ,催化磷酰基由供体三磷酸腺苷 (ＡＴＰ)转移到蛋白的氨基酸残基上 ,从而引起蛋白构象变化而改变活性 ,最终导致生理现象的改变 ;并且与细胞内信使系统有着密切的联系。其中尤以酪氨酸蛋白激酶(ＴＰＫ )、蛋白激酶Ｃ (ＰＫＣ)和蛋白激酶Ａ(ＰＫＡ)最为重要。ＰＫＡ与细胞分化性增殖有关 ,而ＰＫＣ和ＴＰＫ则与去分化性增殖有关 ,ＰＫＡ、ＰＫＣ在Ｒａｓ-ＭＡＰＫ信号传导系统中起正、负调节作用。利用 7- 32Ｐ -ＡＴＰ作为反应启动剂搀人外源性底物的方法测定乌贼墨对小时癌细胞ＴＰＫ、ＰＫＣ及ＰＫＡ活性的影响。结果发现 ,癌细胞质膜、胞浆及线粒体ＴＰＫ活性均显著升高 ,以质膜ＴＰＫ活性升高最显著 ;胞浆、线粒体及胞核ＰＫＣ活性均显著升高 ,以胞核ＰＫＣ升高最明显 ;胞浆内ＰＫＡ活性升高(可能是代偿性升高 )。经乌贼墨作用后 ,癌细胞质膜、胞浆及线粒体ＴＰＫ活性均显著下降 ;线粒体及胞核ＰＫＣ活性均显著下降 ;胞浆ＰＫＡ活性却继续明显升高 ,这可抑制Ｒａｓ -ＭＡＰＫ信号传导作用。提示乌贼墨能明显逆转癌细胞异常改变的ＴＰＫ、ＰＫＣ和ＰＫＡ活性 ,引起Ｒａｓ-ＭＡＰＫ信号传导系统抑制 ,使癌细胞由去分化性增殖向分化性增殖转变 ,产生抗癌促分化作用 ,表明乌贼墨可能属于蛋白激酶抑制剂类物质。

　　影响红细胞免疫黏附肿瘤细胞能力

　　红细胞的免疫黏附 (ＲＣＩＡ)作用 ,是指抗原和抗体复合物与补体Ｃ3ｂ结合后可黏附到未致敏红细胞表面。红细胞与病毒、细菌等微生物黏附后可使吞噬细胞对其吞噬作用增强 46倍。血循环中 9 5%以上的Ｃ3ｂ受体存在于红细胞表面 ,结合有抗体和补体的肿瘤细胞可通过Ｃ3ｂ受体黏附到红细胞上 ,易被吞噬细胞捕获及吞噬。乌贼墨可通过激活红细胞Ｃ3ｂ受体活性来增强红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力 ,同时增强白细胞的免疫黏附和杀伤作用 ,从而有力地阻抑肿瘤细胞的运行和淋巴结转移。其激活机制可能是乌贼墨中的多糖与红细胞膜受体巯基和淋巴细胞相关抗原 - 3(ＬＡＦ - 3)结合 ,引起受体变构 ,增加Ｃ3ｂ受体的集簇分布 ,从而提高其活性。

　　影响细胞内Ｃａ2+浓度

　　ｃ-ｆｏｓ和ｃ - ｊｕｎ基因均为核内基因 ,属早期反应基因 ,它们的表达受许多信号系统的调节 ,特别是受Ｃａ2+浓度变化的影响。细胞核内Ｃａ2+浓度受细胞浆内Ｃａ2+浓度和核膜上Ｃａ2+依赖性Ｃａ2+ /Ｍｇ2+ -ＡＴＰ酶的调节。ｃ -ｊｕｎ可与ｃ -ｆｏｓ形成二聚体 ,与ＤＮＡ结合 ,作为转录活化因子ＡＰ - 1,然后与纤溶酶原激活剂 (ＴＰＡ)反应元件结合 ,调节基因转录、细胞分裂、分化及增殖。用乌贼墨给小鼠灌胃后 ,测定癌细胞内Ｃａ2+浓度、核膜Ｃａ2+ /Ｍｇ2+ -ＡＴＰ酶活性及ｃ-ｊｕｎ和ｃ -ｆｏｓ表达的变化。结果表明 ,Ｃａ2+浓度随给药剂量的增加而明显下降 ,与对照组相比 ,两种剂量的乌贼墨分别使Ｃａ2+的浓度下降了 69 . 4%和 78. 6%,差异有高度显著性。Ｃａ2+浓度的降低会影响到细胞核上Ｃａ2+依赖性Ｃａ2+ /Ｍｇ2+ -ＡＴＰ酶的活性 ,经检测两种剂量的乌贼墨使酶的活性分别下降了 21%和 37%;减少了Ｃａ2+向细胞核内的转运 ,减弱了Ｃａ2+对ｃ -ｆｏｓ及ｃ - ｊｕｎ表达的促进作用 ,抑制了细胞的分裂增殖。