人参可以增强人体对物理、化学、生物等有害因素的抵抗力 ,这就会使人们相信人参的免疫调节活性与人体免疫系统的调节作用有关。人体的免疫系统在机体的自我保护机制中起着非常重要的作用 ,其中生物效应是免疫调节的一个重要途径。在对人参免疫活性的研究中 ,人们往往将更多的注意力集中在人参多糖上。最近有报道 ,从人参根中分离得到的人参多糖具有促有丝分裂的活性、抗低血糖活性、抗肿瘤活性和在环磷酰胺治疗免疫抑制小鼠过程中起到免疫调节的作用。而且 ,从人参根中得到的酸性多糖具有抑制毒激素Ｌ促进脂肪分解的作用 ,可降低原发性肿瘤的发病率。所以 ,酸性多糖是人参在临床应用中起作用的主要成分。现将红参酸性多糖 (ＲＧＡＰ)的免疫调节功效进行归纳。
1.ＲＧＡＰ可促进脾细胞增加
红参酸性多糖 (ＲＧＡＰ)含酸性糖 56. 9 %,中性糖 28. 3%。通过ＧＣ/ＭＳ进行分析 ,其中糖的组成为 :葡萄糖醛酸 51. 8%、葡萄糖 26.1%、半乳糖醛酸 5. 1%和阿拉伯糖 1. 6%。通过ＳｅｐｈａｃｙｌＳ - 300凝胶柱层析测定ＲＧＡＰ分子量为 12ＫＤａ - 450ＫＤａ。将ＲＧＡＰ连续七天通过腹腔注射对小鼠给药 ,然后通过流动血细胞记数对脾细胞的亚型进行分析 ,结果发现ＲＧＡＰ使ＣＤ4+、ＣＤ8+以及ＣＤ45Ｒ/Ｂ220+Ｂ淋巴细胞的数量降低 ,而巨噬细胞和自然杀伤细胞等ＣＤ11ｂ细胞的数量显著增加。除此之外 ,脾的重量和脾细胞总数都有显著的增加。而巨噬细胞的增加和脾的增生被认为是ＲＧＡＰ免疫调节作用的主要因素。
2.ＲＧＡＰ可使巨噬细胞产生的一氧化氮增加
最近的研究表明 ,巨噬细胞中一氧化氮的释放为抗肿瘤和抗微生物活性的主要作用方式 ,为了进一步研究脾中巨噬细胞的增加和抗肿瘤活性的关系 ,对ＲＧＡＰ对ＢＡＬＢ/ｃ小鼠一氧化氮的产生和一氧化氮诱导合成酶 (ｉＮＯＳ)的影响作了进一步研究。在 100ｍｇ/ｋｇ体重和300ｍｇ/ｋｇ体重的剂量下 ,ＲＧＡＰ可以使巨噬细胞产生的一氧化氮增加。分析显示 ,有130ＫＤａ的ｉＮＯＳ蛋白键合在ＲＧＡＰ治疗组的小鼠中 ,而对照组小鼠没有发现。体内实验的结果也表明 ,巨噬细胞是ＲＧＡＰ抗肿瘤活性的主要作用媒介。
3.ＲＧＡＰ可抑制肿瘤细胞生长癌症治疗最重要的目的就是延长肿瘤患者的生存时间 ,减轻其病痛。研究人员采用ｓａｒ ｃｏｍａ 180腹水肿瘤细胞移植的ＩＣＲ小鼠对ＲＧＡＰ的抗肿瘤作用进行评价。肿瘤细胞移植后 ,通过腹腔注射对小鼠给药 7天 ,发现小鼠的存活率在 50、100、300ｍｇ/ｋｇ的剂量下均大于阳性对照药物 (从ｃｒｏｉｏｌｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ .中分离到的多糖Ｋ)。特别是在 300ｍｇ/ｋｇ的剂量下 ,ＲＧＡＰ表现出与氟尿嘧啶 (7. 8ｍｇ/ｋｇ)同样的作用。在固体状态下 , 300ｍｇ/ｋｇ剂量的ＲＧＡＰ对ｓａｒｃｏｍａ 180腹水肿瘤细胞和 3ＬＬＬｅｗｉｓ肺肿瘤细胞均显示有显著的抑制作用 ,抑制率分别为 30%和 40%。
4.ＧＦＰ可能是ＲＧＡＰ抗肿瘤的活性部位为了寻找ＲＧＡＰ中的活性组分 ,通过超滤、阴离子色谱、ＥＤＴＡ -凝胶处理 ,最后经过ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ - 300凝胶柱层析 ,对ＲＧＡＰ进行不断精制和纯化 ,通过监视对小鼠脾细胞的促有丝分裂活性和对巨噬细胞一氧化氮的产量的影响 ,最后得到活性部位 (ＧＦＰ)。其对巨噬细胞一氧化氮产量增加的作用 5倍于ＲＧＡＰ ,表明其可能为ＲＧＡＰ中主要的活性物质。通过ＧＣ/ＭＳ对其糖组成进行分析 ,发现ＧＦＰ的组成为 :阿拉伯糖 :鼠立糖 :木糖 :葡萄糖醛酸 :甘露糖 :半乳糖 :葡萄糖 =10: 9 : 1: 25: 8: 20: 27。
5.ＧＦＰ的抗肿瘤活性是ＲＧＡＰ的 10倍采用ｓａｒｃｏｍａ 180腹水肿瘤细胞移植的ＩＣＲ小鼠对ＧＦＰ和ＲＧＡＰ的抗肿瘤作用进行比较 ,结果发现 ,在 10ｍｇ/ｋｇ和 30ｍｇ/ｋｇ剂量下 ,ＧＦＰ对小鼠的存活率的延长作用 10倍于ＲＧＡＰ ,强于阳性药物Ａｒａ-Ｃ(5ｍｇ/ｋｇ ,市场上用于白血病的抗肿瘤药 )。ＧＦＰ在 10ｍｇ/ｋｇ的剂量下 ,与 100ｍｇ/ｋｇ的ＲＧＡＰ相同。在固体状态下 ,ＧＦＰ对Ｂ16黑素瘤细胞的生长的抑制作用是ＲＧＡＰ的 10倍 ,ＧＦＰ在 10ｍｇ/ｋｇ和30ｍｇ/ｋｇ剂量下的抑制率分别为 47%和 46%。在 10ｍｇ/ｋｇ和 30ｍｇ/ｋｇ剂量下 ,ＧＦＰ杀死靶细胞Ｙａｃ - 1淋巴瘤细胞和Ｐ815肥大细胞瘤细胞的作用为ＲＧＡＰ作用的 10倍。
通过以上结果表明 ,ＲＧＡＰ通过促进巨噬细胞中一氧化氮的产生表现出抗肿瘤活性 ,抑制肿瘤细胞系的生长 ,在肿瘤的临床免疫治疗实验中证明是可行的。但使用生物反应调节剂对肿瘤免疫治疗需要更深入的研究 ,ＲＧＡＰ的免疫调节抗肿瘤活性也需要在细节上更深入的探讨。除此之外 ,对ＧＦＰ进行糖序列的分析以试图发现糖链结构和活性之间的关系也将成为研究人员下一步研究的方向。
