细胞免疫治疗是肿瘤治疗中一种重要的辅助治疗方法 ,细胞因子诱导的杀伤 (ＣＩＫ)细胞一直备受关注。ＣＩＫ细胞本身对化疗药物敏感 ,限制了ＣＩＫ细胞的应用。北京大学第一医院应用电穿孔方法将ｍｄｒ1基因转入ＣＩＫ细胞 ,观察了转基因对其产生耐药性以及对肿瘤细胞杀伤活性的影响。

　　方法 :用ＩＦＮ -γ、ＣＤ3单抗、ＩＬ - 2、ＩＬ - 1等细胞因子体外诱导外周血单个核细胞获得ＣＩＫ细胞。采用电穿孔方法将ｍｄｒ1基因表达质粒ｐＨａｍｄｒ转入ＣＩＫ细胞。转染后 72小时提取细胞总ＲＮＡ ,ＤＮＡ酶消化残留质粒ＤＮＡ后进行ＲＴ -ＰＣＲ(逆转录聚合酶链反应 ),鉴定ｍｄｒ1基因表达 ;流式细胞仪检测细胞膜耐药蛋白 (Ｐ -ｇｐ)表达。噻唑蓝比色法 (ＭＴＴ)检测转基因后ＣＩＫ细胞对阿霉素和秋水仙碱的耐药性 ;同时检测转染前后ＣＩＫ细胞对ＭＣＦ7细胞 (人类乳腺癌细胞系 )的杀伤活性变化。结果 :转染ｍｄｒ1后的ＣＩＫ细胞ｍｄｒ1ｍＲＮＡ阳性 ,Ｐ -ｇｐ阳性的ＣＩＫ细胞为 21%～3 7 %(平均 27%)。转染后ＣＩＫ细胞获得了多药耐药性 ,对阿霉素的ＩＣ50值较转染前升高了 22. 3～ 45. 8倍 ,对秋水仙碱的ＩＣ50值升高了 6. 7～ 11. 35倍。转染前后ＣＩＫ细胞对ＭＣＦ7肿瘤细胞的杀伤活性无明显变化 (Ｐ >0. 05)。

　　结论 :ＣＩＫ细胞转入ｍｄｒ1基因后获得了多药耐药性 ,转染后的ＣＩＫ细胞仍然保持原有的肿瘤细胞杀伤活性。

作者：未知 文章来源：不详 更新时间：2006-11-10