抗呆Ｉ号是以天麻和钩藤 (主要成分为天麻素和钩藤碱 )为主的中药制剂 ,《中国临床康复》2004年第 1期报道了北京中医药大学基础医学院形态系宋岳涛、唐一鹏等有关抗呆Ｉ号对体外模拟脑缺血再灌注损伤星形胶质细胞的影响的研究。他们在大鼠大脑皮质星形胶质细胞分离纯化培养的基础上 ,制作体外模拟脑缺血再灌注损伤模型 ,观察星形胶质细胞活性及存活率的变化、培养液蛋白质含量的变化和抗呆Ｉ号的影响 ,目的是揭示星形胶质细胞在体外模拟脑缺血再灌注损伤中胞内与胞外的一些变化规律和中药抗呆Ｉ号可能的作用途径。
方法 :先对分离纯化培养的星形胶质细胞进行体外模拟脑缺血再灌注损伤模型的建立 ,然后采用ＭＴＴ法对星形胶质细胞的活性和存活率进行测定以及用Ｂｒａｄｆｏｒｍ法对星形胶质细胞条件培养液中蛋白质含量进行测定。
结果显示 :体外培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞在体外模拟脑缺血再灌注损伤中的活性、存活率、无血清条件培养液蛋白含量的变化具有一定的规律性 ,可分细胞损伤期、功能代偿期、功能低下期和功能恢复期。抗呆Ⅰ号可使受损的星形胶质细胞的活性明显增强 (与模型组相比多数时间点比较ｔ=2. 074,Ｐ <0. 05),存活率显著提高 (与模型组相比多数时间点Ｐ <0. 05,ｔ>2. 219 ),使其条件培养液中的蛋白含量迅速增高 (与模型组相比多数时间点ｔ>5. 087,Ｐ <0. 001)。
宋岳涛、唐一鹏等指出 :实验结果提示 ,中药抗呆Ｉ号对正常培养的星形胶质细胞只产生轻微的影响 ,各项测定指标正常组和正常用药组相比均无统计学差异 ;而它对缺血再灌注损伤的星形胶质细胞则产生显著影响 ,模型组和模型用药组相比有统计学意义 ,故在此只分Ｎ、Ｍ和Ｍｙ来分析。星形胶质细胞在脑缺血再灌注损伤中的变化可分以下 4期 :1.细胞损伤期 :从缺血开始至再灌注 3小时末。此期因换液两次 ,加之细胞功能受损 ,培养液中的蛋白含量很低。中药抗呆Ｉ号加入培养液中 ,它会促进细胞的分泌功能 ,减少蛋白质的漏出 ,未用药的损伤细胞因胞膜破坏胞内蛋白漏出较多 ,所以此期 3组细胞的活性和存活率表现为 :Ｎ >Ｍｙ >Ｍ ,而培养液中蛋白含量则是 :Ｎ >Ｍ >Ｍｙ。 2.功能代偿期 :从再灌注 3小时末至再灌注 18小时末。此期细胞因受外来因素的刺激在一定程度上表现为细胞活性、增生能力和分泌功能代偿性的增强 ,胞内细胞活性和存活率为 :Ｎ >Ｍｙ>Ｍ ,胞外蛋白含量为 :Ｎ >Ｍｙ >Ｍ ,但从增强的幅度来看Ｍ组均较小。 3.功能低下期 :从再灌注18小时末至再灌注 36小时末。此期细胞活性和胞外蛋白含量均为 :Ｎ >Ｍｙ >Ｍ ,都表现为下降趋势。从培养液蛋白含量的变化来看 ,Ｎ下降幅度较小 ,而Ｍｙ和Ｍ下降幅度较大。 4.功能恢复期 :从再灌注 36小时末至再灌注 9 6小时末。培养的细胞受到一定的损伤刺激后 ,会激发内源性的保护机制使星形胶质细胞的分泌功能增强 ,从而达到维持内环境稳定的目的。此期Ｎ和Ｍｙ两组细胞的活性和存活率以及细胞培养液蛋白含量逐渐趋于一致 ,而Ｍ组仍处于较低水平 ,说明抗呆Ｉ号具有使受损细胞功能尽快恢复正常的作用。
结论 :抗呆Ｉ号具有间接保护和修复受损神经元的作用 ,其途径为 :脑缺血再灌注损伤→星形胶质细胞受刺激或受损→抗呆Ｉ号使星形胶质细胞的损伤减轻或使其分泌功能增强→细胞外液中神经营养因子等增多→保护和修复受损的神经元。
